龙胆紫溶液是什么作用?

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在鉴定细菌、真菌和病毒等微生物时,为了判断微生物是否死亡或存活,需要将待测微生物染色。传统的染色剂有结晶紫、伊红、亚甲蓝等,但这些染料存在着色不稳定、着色效果不佳的缺点。70年代出现一种新型的染色剂——龙胆紫溶液(又称醋酸洋红色)。这是一种碱性染料,对细胞无染色活性,但能改变细胞膜的通透性,使细胞内物质渗出细胞膜外与染料结合而呈色调一致的紫色。所以,用龙胆紫溶液染色后,细胞能继续保持原有的结构形态.因此可用于活细胞的染色。由于龙胆紫溶液染色反应快速、操作简便、染色后可见细胞结构而深受广大生物学工作者的喜爱。

现介绍其染色步骤如下: 1.载玻片消毒:将两块载玻片放入盛有酒精的烧杯中浸泡,加盖,浸没酒精的载玻片,待酒精完全蒸发(约2~3min)取出擦干待用。

2.涂片制作:用无菌枪头吸取适量标本液涂布于洁净干燥的载玻片上,均匀铺开,盖上盖子,防止空气进入人体呼吸道。

3.固定:在染色的过程中,须注意避免染色剂的扩散。将载玻片上标本表面用水砂纸轻轻磨平,以去除表面的纤维成分;然后用玻璃泡帽遮蔽,勿使接触空气,以免褪色。

4.染色:将配好的龙胆紫溶液倒在涂片上,颜色稍变深后立即用清水冲淋干净,并用吸水纸吸干多余水分(切勿用力挤压,以防染色剂渗进细胞内)。

5.复染:为防脱色,需进行复染。先在染缸中倒入新鲜配制的碘液,加入双氧水,搅拌混匀。再用吸管取少量滴加到涂片上。待全部着色后,用吸水纸吸去多余液体,晾干。

6.叶绿体着色:取配制好的丙酮溶液与番笕溶液按体积比1∶1混合,用吸管吸取一滴滴加到叶绿体分布较多的部位,放置数秒后,在阳光下照射片刻即可。

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